基礎研究中如果加入動物實驗部分則使得研究更加趨于完善,投稿時(shí)中稿率也相應會(huì)增加。但將(jiāng)動物實驗做好(hǎo)卻不是一件容易的事(shì)情。
這(zhè)篇文章主要講動物模型的構建技術,把骨科、糖尿病相關的動物模型構建做了一個全面(miàn)的技術彙總,建議先碼後(hòu)讀,文章内容有部分做了簡化,想看詳細講解可以在文末獲取課件!
一、骨科相關動物模型
1.骨關節炎
1)骨關節炎模型構建方法(誘發(fā)性)-關節腔内手術法、關節腔注射法。
2)模型評分标準
① Safranin O染色與OARSI評分(PMID:31046827、30942801)
② HE染色與OARSI評分(PMID:30609097)
③ Safranin O染色與Mankin評分(PMID:30609097)
2.骨質疏松症
1)骨關節炎模型構建方法
去趨法模型
PMID:31037128
實驗動物:小鼠
方法:在戊巴比妥麻醉下進(jìn)行雙側卵巢切除術以誘導骨質疏松症,同時(shí)對(duì)照組小鼠僅進(jìn)行卵巢外置但未切除。
2)模型檢測指标(PMID:31037128)
① HE染色
② Micro-CT
③ TRAcP染色
④ Micro-CT相關指标檢測
3.類風濕性關節炎
類風濕性關節炎(RA)是一種(zhǒng)慢性自身免疫性疾病狀态,其特征是滑膜增生,軟骨退化和脊椎關節的骨侵蝕
4.強直性脊柱炎
1)強直性脊柱炎模型構建方法
2)模型檢測指标 (PMID:15082495、7561688)
① HE染色
② 關節側視圖
③ PCR鑒定
二、糖尿病相關動物模型
1.糖尿病動脈粥樣硬化
1)模型構建(PMID:30826357)
使 用 鏈 佐 星 (STZ) 注 射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病 ApoE-/-小鼠模型,同時(shí)與 ApoE-/-小鼠采用高脂喂養 18 周
2)模型檢測指标(PMID:29107826、28345659)
3)生化指标檢測
4)超聲檢測
5)主動脈染色檢測
2.糖尿病心肌病
1)誘發(fā)性DCM模型
模型構建(PMID:29732743)
實驗動物:大鼠
方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150 mg·kg-1( STZ用0.1 mol·L-1,pH 4.2檸檬酸-枸橼酸鈉溶液稀釋,現配現用),并給予高脂飼料進(jìn)行喂養。
① 模型檢測指标血糖檢測
② HE染色
③ 超聲心電圖
2)自發(fā)性1型DCM模型
3)自發(fā)性2型DCM模型
3.糖尿病視網膜病變
1)模型構建PMID:30862093
實驗動物:小鼠
方法:糖尿病雄性db / db(BKS.Cg-Dock7m + / + Leprdb / J)小鼠。喂養至21周
2)模型檢測指标
①膠質原纖維酸性蛋白染色
②TUNEL和HE染色
DR組視網膜組織内核層及外核層結構松散,細胞排列紊亂
GCL,神經(jīng)節細胞層; INL,内核層; ONL,外核層
三、動物模型構建總結
1.臨床資料合理性
在納入臨床資料時(shí),需關注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達等具有相關性。
2.模型合理性
選擇合适,簡便,成(chéng)模率高,重複性強的建模方法使實驗設計更合理。
3.檢測指标的合理性
針對(duì)特定模型,特異性選擇檢測指标,如骨質疏松主要在于骨密度相關指标的檢測,而類風濕關節炎主要在于滑膜增生、軟骨退化相關指标的檢測。
4.建模時(shí)需遵守動物實驗倫理
對(duì)實驗動物産生疼痛的手術需進(jìn)行麻醉且術後(hòu)需鎮痛,動物模型構建完成(chéng)後(hòu)需最大程度的利用動物模型。