大家好(hǎo)，我是一隻SPF級動物房的基因編輯小鼠，聽實驗室的哥哥姐姐們說(shuō)現在外面(miàn)已經(jīng)30多度的高溫了，在外面(miàn)呆幾分鍾就(jiù)能(néng)汗流浃背。雖然我沒(méi)有汗腺，但是光想象一下就(jiù)覺得鼠生艱難啊…不過(guò)上完最後(hòu)一節課就(jiù)要放暑假，去一個新的環境、參與完成(chéng)一項偉大的實驗了~但是我們中有的是短途貨車出行，有的是長(cháng)途跨省出行，據說(shuō)這(zhè)其中還(hái)有很多學(xué)問呢！求知欲強的我決定好(hǎo)好(hǎo)查閱文獻科普一下。
　　小鼠作爲最重要的模式生物之一，近年來需求量越來愈大，特别是随著(zhe)基因編輯技術的發(fā)展，使得基因修飾的小鼠成(chéng)爲了科研的必備工具，各個科研單位之間合作交流日益廣泛，使得小鼠運輸需求不斷增多，其中既包括第三方機構定制的模型鼠，科研合作者贈送的動物，甚至不乏來源于國(guó)外的實驗動物。然而實驗動物運輸會(huì)遇到諸多問題，如運輸後(hòu)小鼠體重驟減，皮毛粗糙無光澤，食欲下降，甚至出現意外死亡等現象，這(zhè)都(dōu)讓我們科研者心疼不已。運輸造成(chéng)的影響不僅妨礙實驗動物的身心健康、降低其福利水平，且幹擾實驗對(duì)象的一緻性，對(duì)獲得的實驗數據造成(chéng)影響，因此實驗動物的運輸問題值得我們重視起(qǐ)來。
　　01 首先，必須重視實驗動物運輸與福利 　　關于實驗動物運輸與福利，國(guó)際上早有明确的運輸規定，規定内容包括了對(duì)動物運輸車輛、運輸物種(zhǒng)、生理階段、年齡和性别、運輸時(shí)間、食水供應、福利保障等，以及對(duì)于動物運輸前準備、運輸過(guò)程中的防護以及人員培訓等方面(miàn)都(dōu)提出了一些要求和規範：
　　1.如AVMA 要求在動物運輸過(guò)程中有專業人員陪同，對(duì)于相關人員需提供專業培訓等［1］；
　　2.AAALAC指南Guide 中，單獨列出動物運輸章節，對(duì)于動物運輸前準備、運輸過(guò)程中的防護和福利保障以及人員培訓等方面(miàn)都(dōu)提出了一些要求和規範；
　　3.國(guó)際獸醫局對(duì)于動物運輸中動物的飲水、食物和運輸包裝盒、安全等方面(miàn)也有明确的規定和指導［2］;
　　4.國(guó)内在動物運輸方面(miàn)的法規相對(duì)起(qǐ)步晚，但目前已經(jīng)有很多相關法規對(duì)動物運輸設備，工具及飲食等方面(miàn)作出了要求。
　　02了解小鼠運輸過(guò)程的應激反應 　　何爲應激？即在運輸過(guò)程中因爲外界因素的刺激導緻實驗動物出現不适反應的情況。
　　引起(qǐ)因素：如運輸過(guò)程中的裝卸、運輸時(shí)間、禁食禁水、運輸籠盒、環境溫度等外界條件造成(chéng)小鼠出現恐懼與疼痛、饑渴、疲勞、通風不良、過(guò)度擁擠等，進(jìn)而引發(fā)動物發(fā)生的應激反應。
　　表現症狀：動物應激反應會(huì)表現爲體重下降、攻擊性加強、心跳和呼吸頻率加快、脫水及對(duì)疾病的抵抗力降低，嚴重時(shí)可影響動物的質量，甚至導緻動物在運輸途中衰竭死亡。并且在不同運輸階段會(huì)有不同變化：
　　●運輸初期：在恐懼、疼痛、關禁、擁擠等應激因子的刺激下，表現不安、狂躁和敏感性增高，或畏縮、顫抖和咬包裝盒（箱）等；
　　●運輸後(hòu)期：逐漸适應後(hòu)，動物安靜下來、對(duì)環境表現出冷漠，對(duì)正常刺激不反應等；
　　●運輸結束後(hòu)：動物飲食飲水減少或廢絕、疲乏衰弱、腹瀉或排便減少、脫水，若仔受刺激，甚至導緻疾病無法恢複、死亡等。
　　舉例：體重下降
　　Sunghak Lee等人以676隻3-9周的大小鼠爲研究對(duì)象，在最優的條件下（規定的溫度，裝載密度及運輸環境等）運輸時(shí)間約爲24h（包括自打包小鼠--拆包裝的時(shí)間），小鼠平均體重下降約0.9%，而大鼠會(huì)更加敏感，平均體重會(huì)下降3.71%。多種(zhǒng)小鼠品系之間C57BL/6小鼠變化最爲明顯，與ICR小鼠下降0.5%相比，C57BL/6平均下降4.69%。提示近交系小鼠相比封閉群小鼠對(duì)于應激更加敏感。文章也提到運輸引起(qǐ)的體重下降是不可避免的，不過(guò)一般大小鼠體重下降約5%是沒(méi)有太大影響，如果運輸時(shí)間長(cháng)、路途遠、包裝密度大體重消耗可能(néng)達到10-15%左右，需要注意。 　　除了體重，還(hái)有一些不易被觀察到的生理變化：
　　如研究表明，短途運輸會(huì)引起(qǐ)小鼠代謝、神經(jīng)内分泌系統和免疫系統的功能(néng)均發(fā)生廣泛而顯著(zhe)的變化，有文獻報道(dào)BALB / c小鼠和ICR 小鼠，經(jīng)1. 5 h 運輸後(hòu)，小鼠血糖( GLU)、外周白細胞總數( WBC)?、血清中皮質酮( CORT)?、白細胞介素2( IL2)和β-内啡肽( β-EP)?均會(huì)明顯降低。不過(guò)在72h之内會(huì)逐漸恢複。 　　03那如何降低應激，保證小鼠運輸福利呢？ 　　運輸過(guò)程中，大小鼠不可避免地會(huì)出現應激反應，我們可以從以下幾個方面(miàn)考慮降低應激反應：
　　1.包裝箱要求
　　包裝箱選擇上，一般市内短途運輸可以選擇内襯細鐵絲網格的硬紙闆箱，如果運輸時(shí)間較長(cháng)需選擇外襯瓦倫紙或鈣塑材料的鐵絲箱盒或塑料箱盒。使用前需仔細檢查鐵絲籠或内襯細鐵絲網是否有凸起(qǐ)倒刺，以防紮傷動物。例如小型齧齒類有專用運輸箱，确保充分換氣和防止外面(miàn)微生物污染。 　　2.裝載密度
　　運輸時(shí)注意降低運輸箱盒中動物的密度，保證動物舒适地站立、躺卧或轉身，可減輕應激反應。例如規格450×250×160 mm的小型運輸箱内放入的小鼠總量最好(hǎo)不超過(guò)10隻，規格600×400×200 mm的大型運輸箱内放入的小鼠總數最好(hǎo)不超過(guò)20隻。如果運輸的小鼠周齡較大或者在飼養過(guò)程中觀察到好(hǎo)鬥的品系，可酌情降低密度。
　　3.飲食與環境
　　運輸箱盒中填充足夠的墊料，至少保證墊料完全覆蓋鐵絲籠盒或塑料箱盒的底部。冬季運輸時(shí)除了适當增加墊料之外，還(hái)可以向(xiàng)運輸箱盒中添加紙屑，棉墊等築巢材料。運輸前還(hái)需在運輸箱中放置足量的飼料，例如全營養果凍，也可使用普通瓊脂果凍代替，爲動物提供水分和營養。中國(guó)國(guó)标則要求運輸時(shí)間超過(guò)6 h 以上需要提供飲食和水，提供食物和飲水不僅補充營養和水分，也是緩解動物緊張情緒和應激反應的手段。 　　4.運輸時(shí)間控制
　　減輕動物應激的一項重要措施就(jiù)是縮短運輸時(shí)間，利用配備有溫濕度監控與調節裝置的專車或飛機運送。如果需要遠距離航空運輸，夏季最好(hǎo)選擇清晨或夜晚的航班，如遇高溫天氣建議將(jiāng)發(fā)貨安排延後(hòu)；冬季最好(hǎo)選擇白天的航班。如果安排貨車陸運，最好(hǎo)保持車内溫度25℃左右并且注意換氣通風，運輸過(guò)程中盡量避免裝有動物的運輸箱盒直接暴露在室外環境中。
　　5.路途颠簸和震動
　　運輸過(guò)程中不可難免會(huì)使動物面(miàn)對(duì)不熟悉的環境和聲音。一些不适當的操作可能(néng)會(huì)使動物恐慌。因此裝卸時(shí)輕拿輕放，避免野蠻操作，運輸時(shí)選擇平坦道(dào)路，避免急停急開(kāi)，盡量降低颠簸和震動。
　　6.特殊小鼠品系特殊對(duì)待
　　如對(duì)于一些免疫缺陷小鼠，有專門的包裝箱。例如，Charles River實驗室的運輸盒（如下圖）就(jiù)是爲運輸免疫缺陷大小鼠模型而開(kāi)發(fā)的，其設計亮點在于有兩(liǎng)個塑料微型隔離籠，安裝在特殊的打撈筒中，塑料籠頂部的過(guò)濾器在提供充足氣流的同時(shí)也能(néng)避免空氣中的微粒進(jìn)入、對(duì)小鼠健康造成(chéng)影響。 　　04貼心tips 　　1.夏天高溫季節可以運輸小鼠嗎？
　　可以，但是必須要求運輸過(guò)程的每一個環節，特别是溫度要控制好(hǎo)，一般需采用全程空調來運輸；空運一般會(huì)走晚上的航班。否則小鼠很容易發(fā)生死亡。
　　2.如何确定空運或陸運？
　　一般會(huì)選擇專業的運輸公司負責，根據路程的長(cháng)短、氣溫高低選擇不同的交通工具，如：飛機、火車、汽車。例如從上海發(fā)往周邊地區浙江、江蘇等，會(huì)安排陸運運輸；如從上海發(fā)往北京、廣東、武漢等較遠的一二線城市一般走空運；需要注意的事(shì)，稍微偏遠的城市要考慮當地機場的配置（沒(méi)有含氧倉飛機）和機場管控（不允許往外運輸活體動物），出現此類情況需要用專車將(jiāng)小鼠運輸到附近其它城市去走空運，這(zhè)樣成(chéng)本就(jiù)會(huì)比較高。
　　3.孕期小鼠可以運輸嗎？
　　不建議長(cháng)途運輸懷孕後(hòu)期和哺乳中的母鼠，以防發(fā)生流産或食仔。幼鼠如需長(cháng)途運輸，最好(hǎo)等離乳飼養至4周齡以上再安排發(fā)運。
　　4.運輸後(hòu)小鼠可以直接用于實驗嗎？如不可以，需要多久？
　　不可以，需要給予足夠的适應期來從運輸應激中恢複。爲了檢查動物體重從運輸應激中恢複的時(shí)間，研究人員對(duì)小鼠和大鼠的體重進(jìn)行了同齡測定，并對(duì)體重變化作出描述。研究中的小鼠到達目的地後(hòu)立即轉移至具有适宜溫度和濕度的飼養設施，小鼠體重在第二天開(kāi)始恢複，三天後(hòu)幾乎就(jiù)可以達到之前的正常水平了[6]。 　　5.動物如何有效并快速恢複？
　　在補充能(néng)量和水分的基礎上，選擇有抗應激作用的氨基酸和維生素制成(chéng)的凝膠狀營養補充劑，并采用運輸同步幹預方式觀察，結果表明營養幹預縮短了應激小鼠WBC和血清GLU、β-EP、IL2水平恢複至正常水平所需時(shí)間。由此得知，在運輸過(guò)程中适當添加凝膠可以有效緩解小鼠的運輸應激，且達到補充能(néng)量、營養等目的。
　　6.運輸後(hòu)的動物，需要檢疫才可以進(jìn)入動物房嗎？
　　一般經(jīng)過(guò)運輸的小鼠不能(néng)直接進(jìn)入SPF級動物房，需要進(jìn)行送檢，若無特定病原菌感染，即需要保證健康來源的前提下，方可送入動物房。
　　7.哪些小鼠不能(néng)直接運輸？
　　接種(zhǒng)了有害物質(例如人類病原體、緻癌物等)不能(néng)在正常情況下運輸。這(zhè)種(zhǒng)動物被認爲是危險的。如必須運輸需申請特殊許可并具備運輸條件。
　　長(cháng)期以來，實驗動物在運輸過(guò)程中多處于條件較差的環境中，人們在觀念上對(duì)于動物在運輸過(guò)程中的應激反應影響實驗結果的現象沒(méi)有給予足夠重視。但是随著(zhe)生命科學(xué)的發(fā)展，研究領域對(duì)于實驗動物質量提出了更高的要求，隻有減少動物運輸過(guò)程中的各種(zhǒng)内外部條件影響，才能(néng)保證實驗動物自身的健康，以及減少對(duì)實驗數據、結果的影響。